尊龙凯时推出了一款基于探针法荧光定量PCR原理的检测试剂盒，具有以下显著特点：

主要特点

1. 即开即用：用户仅需提供样品DNA模板即可开始检测。
2. 优化组分：引物等组分经过精细优化，具备高灵敏度。
3. 阳性对照：本产品附带阳性对照，便于识别假阴性样品。
4. 高特异性：引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区域，确保无交叉反应发生。
5. 多用途：本试剂盒适用于定性与定量检测，定量检测时线性范围达5个数量级。
6. 高效量程：产品可支持50次20μL的探针法荧光定量PCR反应。
7. 科研专用：本产品仅适用于科研目的。

操作步骤

步骤一：DNA提取
使用自选方法提取和纯化样品DNA，本试剂盒与市面大多数核酸提取试剂盒兼容。

步骤二：稀释标准曲线样品
为了避免污染，稀释操作需在独立区域内进行。
1. 标记6个离心管：7，6，5，4，3，2。
2. 每个管中加入45μL DEPC-H2O。
3. 在7号管中加入5μL 1×10⁸拷贝/μL的阳性对照，震荡1分钟，得1×10⁷拷贝/μL的标准样品，置冰上待用。
4. 更换枪头，在6号管中加入5μL 1×10⁷拷贝/μL的阳性对照，震荡1分钟，得1×10⁶拷贝/μL的标准样品，置冰上待用。
5. 重复上述操作，直到获得6个稀释样品。若无需制作标准曲线，只需将阳性对照稀释至1×10⁵拷贝/μL即可。

步骤三：试剂配制
如果有N个待检样品，请准备N+2个qPCR管（包含N个待检样品、1个阴性对照和6个阳性对照），并向各PCR管中加入相应成分（详细信息请咨询尊龙凯时）。

步骤四：添加模板
向每个qPCR管中分别加入2μL模板，添加顺序为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品模板和婴儿利什曼虫qPCR阳性对照，随后离心30秒，立即进行扩增反应。

步骤五：扩增反应
将PCR管放置于PCR扩增仪器的适当位置，按照预设的扩增程序进行扩增（详细程序请咨询尊龙凯时）。

步骤六：结果分析
1. 制作标准曲线时，以阳性对照浓度的log值为横轴，以Ct值为纵轴绘制标准曲线，通过待测样品的Ct值推算样品DNA浓度的log值。
2. 若未制作标准曲线，判定结果如下：
    阳性对照：Ct值<30，出现明显的指数增长，呈现典型S型曲线。
    阴性对照：Ct值38或无Ct值，未见明显指数增长或平台期。
    样本检测结果：Ct值<35，表明样本中检测到婴儿利什曼虫，为阳性结果；若Ct值38或无Ct值，则为阴性；Ct值在35-38范围时需复检。

运输及保存：本产品需低温运输，储存条件为-20℃，保存期限为一年。请单独存放阳性对照，以免污染其他试剂。通过尊龙凯时的专业产品，确保您的研究工作高效可靠。