本试剂盒仅适用于科学研究,不得用于医学诊断。以下是人CC趋化因子受体1(CCR1) Elisa试剂盒的使用说明。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,按照顺序加入样本、标准品和HRP标记的检测抗体。经过温育并彻底洗涤后,使用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转变为蓝色,随后在酸性环境中变为最终的黄色。显色的深浅程度与样品中的adropin(AD)浓度成正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),从而计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作时避免任何细胞刺激。收集血液后,3000转离心10分钟,迅速小心地分离血清和红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟,取上清液。
3. 细胞上清液:进行3000转离心10分钟,以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,随后3000转离心10分钟,取上清液。
5. 保存:如果样本在收集后没有及时检测,请按一次用量分装,并冻存于-20℃,以避免反复冻融。解冻时请在室温下进行,并确保样品完全均匀解冻。
操作注意事项
试剂盒组成及标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。
试剂的准备:20×洗涤缓冲液需用蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法请依照相关步骤进行。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作为横坐标,对应的OD值为纵坐标,绘制标准品线性回归曲线,依据曲线方程计算各样本的浓度值。
免责声明:请遵循以上步骤,确保准确性,同时注意本试剂盒的使用限制。
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