1. 目的细胞按照标准细胞培养方案在血清培养基中进行培养。
2. 检测前一天，采用无血清培养基（0.2% BSA）进行处理。
3. 在无血清培养基中培养过夜后，吸出细胞培养基并用PBS进行冲洗。
4. 加入胰蛋白酶溶液，以启动细胞分离过程。
5. 将细胞悬液转移至试管中，并以350×g离心5分钟。
6. 将细胞重新放入预热的细胞培养基中。
7. 将细胞悬浮液稀释至100,000个细胞/ml的接种密度。

1. 向接收板的每个孔中添加200μl含或不含化学引诱剂的培养基（在此情况下，不同浓度的FCS从0.25%到10%）。
2. 将制备好的细胞悬液以50μl的量加入膜板各孔中。
3. 将细胞培养板放置于37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养24小时。

1. 从接收板各孔中吸出细胞培养基。
2. 向接收孔中加入150μl无血清培养基与8μM（在DMSO中稀释）钙黄绿素AM。
3. 在37°C、5% CO2的环境中培养45分钟。
4. 从膜板和接收板的每个孔中吸出细胞培养基。
5. 用PBS对两个板的孔进行冲洗。
6. 向接收板中添加胰蛋白酶溶液，以促使膜下侧迁移的细胞开始脱离。
7. 胰蛋白酶溶液孵育10分钟，并轻轻摇动。
8. 将180μl胰蛋白酶细胞悬浮液转移至黑色96孔微孔板的每孔。
9. 用激发波长为485nm、发射波长为520nm的读板器读取荧光信号。

1. 从膜板各孔中吸出培养基。
2. 使用预湿棉签，顺时针和逆时针方向轻轻旋转棉签，以去除膜上部（顶端）未迁移的细胞。
3. 采用绿色通道的荧光显微镜检测膜下侧迁移细胞的荧光信号。此外，ThinCert® 96孔HTS小室因其独特的孔结构，提供了高透明度。这一特性有助于活细胞观察，便于检查细胞形态、评估细胞融合，并能以更高的准确性与可靠性监测污染。因此，每次实验都伴随着对细胞的持续显微镜监测。

在寻找更佳生物标志物、治疗靶点以及干预肿瘤转移、血管生成和炎症性疾病等复杂现象的过程中，体外细胞迁移实验是不可或缺的工具。它们为测量细胞迁移提供了可控环境，并分析不同分子的影响，例如生长因子和趋化因子，或候选药物。在进行迁移实验时，孔径的精准选择显得尤为重要。孔径应与所研究细胞的尺寸相适应，既要具备足够的限制性以防止细胞的被动移动，又要有足够的允许性以促进细胞的主动迁移。下表提供了针对一般膜孔径选择的建议。

在这一领域，尊龙凯时致力于提供高效的解决方案，以支持研究人员在生物医疗方面做出更卓越的贡献。体外迁移实验的研究不仅提升了我们对细胞行为的理解，也为新的治疗策略提供了可能的方向，有助于推进相关疾病的突破性进展。